Laboratório de Organização Funcional do Núcleo
Coordenação: Profª. Drª. Maria Aparecida Fernandez
Contato: mafernandez@uem.br
Introdução
A sericicultura é uma atividade econômica de significativa relevância para o agronegócio brasileiro, tanto pela geração de riqueza quanto pela inclusão social. Essa atividade proporciona trabalho no campo com a criação do Bombyx mori (bicho-da-seda) e o cultivo da amoreira e, na cidade, na indústria de fiação e no comércio. Embora a participação do Brasil ainda seja pequena no mercado mundial, ele está em terceiro lugar, atrás apenas da China e da Índia. O Paraná é o maior produtor, com 89,59% do total de casulos verdes (casulos com crisálidas vivas no seu interior, forma na qual os produtores vendem seus produtos para a indústria de fiação), sendo que o município de Nova Esperança (40 km de Maringá) é o maior produtor do país. Segundo a EMATER, na safra 2004/2005 foram produzidos no Paraná 6.405 toneladas de casulos verdes, gerando um valor bruto de R$ 39.122.270,00. As empresas sericícolas atuando no momento são a Fiação de Seda BRATAC S/A e a Fujimura do Brasil. Em Maringá, a COCAMAR Cooperativa Agroindustrial, atuava no setor não só no fornecimento de híbridos, mas na manutenção de um banco de germoplasma composto de 16 matrizes de B. mori. Esse acervo genético foi recentemente doado à UEM, a qual está implementando projeto junto à Associação de Sericicultores de Nova Esperança para a manutenção dessas matrizes. Na UEM, o grupo da Profa. Dra. Maria A. Fernandez e na UNIOESTE o grupo da Profa. Dra. Rose M.C. Brancalhão desenvolvem projetos de genética molecular e de resistência a patógenos com essas 16 matrizes. A identificação das melhores matrizes de B. mori, as quais irão direcionar futuros cruzamentos para obtenção de híbridos com patente UEM, depende de projetos que analisem a sua alta variabilidade genética, a qual afeta os aspectos morfológicos do organismo, correlacionados ao desenvolvimento e comportamento e, sobretudo, às características consideradas de importância econômica. Dentre essas características podemos citar a produção de casulos com alto teor de seda líquida e a resistência a variações climáticas e patógenos no campo. Atualmente, a infecção pelo Nucleopolyhedrovirus subgrupo múltiplo (BmMNPV), isolado geográfico do Paraná e agente etiológico da doença conhecida como amarelidão, é responsável por significativas perdas na produção de casulos. O conhecimento do produto de expressão de genes que permitam a resistência de híbridos de B. mori a esse baculovírus é um objetivo a ser alcançado pelas empresas sericícolas. Um híbrido com essas características e que apresente casulos com alto teor de seda líquida será de alto valor comercial. Com o objetivo de identificar genes diferencialmente expressos, grupos japoneses e chineses desenvolvem projetos para a obtenção de EST (Expressed Sequence Tags) desse lepidóptero, assim como já determinaram a seqüêcia nucleotídica de seu genoma. Em relação ao transcriptoma de B. mori, estão depositadas cêrca de 131.259 EST derivadas de inúmeras bibliotecas de cDNA tecido específicas. Entretanto, observa-se a clusterização no UniGene de somente 6.755 grupos com um total de 101.932 seqüências.Esses ESTs são obtidos de bibliotecas convencionais que privilegiam seqüências residentes nas extremidades 5’ e 3’ e, só recentemente, a obtenção de bibliotecas subtrativas foi incorporada nessas análises. Diferentemente das trabalhosas e custosas bibliotecas de subtração, a metodologia ORESTES (Open Reading Frame Expressed Sequence Tags) é baseada em RT-PCR de baixa estringência, gerando, preferencialmente ESTs das regiões codificadoras centrais dos transcritos e pouco abundantes. Nessa área de atuação, os objetivos dessa proposta são: gerar, analisar e validar in silico cêrca de 2.000 seqüências tipo ORESTES derivadas de bibliotecas de cDNA de tecido gorduroso de lagartas na 5a idade de matrizes C24A e M11A, identificadas, respectivamente, como a mais resistente e a mais sensível à infecção pelo BmMNPV, através de bioensaios e marcadores moleculares. É importante salientar que essas seqüências de expressão diferencial contribuirão na determinação do transcriptoma de B. mori, no direcionamento da criação racional do bicho-da-seda, e no desenvolvimento de estudos comparativos entre os genomas de lepdópteros e outros insetos.